1. 關(guān)鍵詞 賽默飛TSQ 8000 Evo；煙草基質(zhì)；農(nóng)藥殘留；快速篩查；方法包

2. 前言 2014 年 1 月 15 日中國煙草總公司頒布了煙草及煙草制品中 多種農(nóng)藥殘留量的測定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YQ/T 47.1—2014，其中第 一部分為串接氣質(zhì)檢測農(nóng)藥殘留的方法。該標(biāo)準(zhǔn)于 2014 年 2 月 10 正式實施。賽默飛世爾科技針對這一行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，開發(fā)了 煙草中檢測多農(nóng)殘的方法。 本實驗用 TSQ 8000 Evo 結(jié)合賽默飛世爾科技農(nóng)殘分析色譜柱 （TR-pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 µm）分析煙草中的 122 種農(nóng)藥殘留，得到了非常出色的結(jié)果。各種農(nóng)藥的低檢測 限在 0.004ppb-0.75ppb 之間，在 5 ppb–200 ppb 的范圍有 良好的線性，且用 10 ppb 樣品連續(xù) 5 針進(jìn)樣，得到 RSD 在 1.01%–9.69% 之間，表明此方法具有良好的重現(xiàn)性。

3. 實驗部分 3.1 儀器和色譜柱 TSQ 8000 Evo 三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Thermo ScientificTM 美 國），TR-pesticide II 農(nóng) 殘 分 析 柱（30 m*0.25 mm*0.25 µm 帶 5m 預(yù)柱）

3.2 儀器方法 GC 方法： 傳輸線溫度：300ºC。 PTV 進(jìn)樣口：起始溫度為 70ºC，進(jìn)樣時間 0.05 min；然后 以 4.5ºC/min 升至 280ºC，保持 1 min，將所有化合物通過 程序升溫的進(jìn)樣方式轉(zhuǎn)移至色譜柱；隨后以 14.5ºC/min 升至 320ºC，保持 5 min，設(shè)置進(jìn)樣口的清潔模式。不分流進(jìn)樣，不分流時間 1.5 min。 載氣：恒流，1.2 mL/min； 柱溫箱：40ºC 起始保持 1.5 min，以 25ºC/min 升至 90°， 保持 1.5 min；再以 25ºC/min 的速率升至 180ºC；隨后以 5ºC/min 的速率升至 280ºC；后以 10ºC/min 的速率升至 300ºC，保持 5 min。整個升溫程序 35 min。 進(jìn)樣量：2 µ

質(zhì)譜方法： 離子源溫度：300 ºC，燈絲電流為 25 µA，采用 T-SRM 方法， 無需分時間段。部分方法如圖 1 所示（總共 402 對 SRM 離子 對）：

3.3 前處理方法 提取 稱取 2 g 樣品于 50 mL 具蓋離心管中，至 0.01 g，加 入 10 mL 水（4.1），手持離心管振蕩直至樣品與水充分混合 后，靜置 10 min。分別移取 10 mL 乙腈（4.2）和 0.1 mL 混 合內(nèi)標(biāo)工作溶液（4.11.4）于該離心管中，并置于漩渦混合 振蕩儀（5.2）上以 2000 r/min 速率振蕩 2 min。將離心管在 （-18℃ ~-20℃）條件下冷凍保存 10 min 后，取出。向離心 管中分別加入 5 mL 甲苯（4.3）、4 g 無水硫酸鎂（4.4）、1 g 氯化鈉（4.5）、1 g 檸檬酸鈉（4.6）、0.5 g 檸檬酸氫二鈉（4.7）， 立即手持離心管劇烈振蕩以防結(jié)塊，再置于漩渦混合振蕩儀 （5.2）上以 2000 r/min 速度振蕩 2 min，然后以 4000 r/min 離心 5 min。收集上層清液備用。

凈化 移取 1.5 mL 樣品提取液上層清液（7.1）于 2 mL 離心管中， 加入 150 mg 無水硫酸鎂（4.4）和 50 mg N- 丙基乙二胺鍵合 固相吸附劑（4.8），于漩渦混合振蕩儀（5.2）上以 2000 r/ min 速率振蕩 2 min，以 4000 r/min 離心 5 min，收集上層清液， 待檢測分析。

4. 實驗結(jié)果 4.1 Auto SRM 優(yōu)化部分化合物的離子對信息 TSQ 8000 Evo 的整個實驗流程可以參考圖 2。TSQ 8000 Evo 自帶的 TraceFinder 軟件有一個數(shù)據(jù)庫，該數(shù)據(jù)庫包含常規(guī)三 重四極桿串接氣質(zhì)上分析的 1000 多種化合物離子對信息，如 農(nóng)藥，環(huán)境污染物等化合物。所以，當(dāng)我們需要完成手頭上化 合物的方法建立時，可以首先參考數(shù)據(jù)庫中的離子對信息。數(shù) 據(jù)庫中查不到的化合物離子對信息，可以使用 TSQ 8000 Evo 特有的 AutoSRM 軟件來自動完成。

AutoSRM 顧名思義就是可以自動優(yōu)化化合物 SRM 離子對的軟 件，該軟件通過選擇母離子，選擇子離子，自動優(yōu)化碰撞能 量這三個步驟可以完成方法優(yōu)化，極大得簡化了常規(guī)串接氣質(zhì) 建立化合物檢測方法的步驟，節(jié)省了時間。賽默飛世爾科技全 新一代三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀 TSQ 8000 Evo *的 AutoSRM 功能，可以自動優(yōu)化離子對信息及碰撞能量，并且當(dāng) 一次優(yōu)化的化合物數(shù)目較多時，可以智能得調(diào)整進(jìn)樣的次數(shù)以 期在少的時間內(nèi)得到優(yōu)化的方法，使得整個方法建立部分 更加簡單方便。

4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 分別配置 5 ppb、10 ppb、20 ppb、50 ppb、100 ppb、200 ppb 的混標(biāo)溶液，采用內(nèi)標(biāo)法定量，內(nèi)標(biāo)為莠去津或者三苯基磷酸酯（按 照保留時間來確定以哪種物質(zhì)為內(nèi)標(biāo)，本實驗保留時間在 20 min 之前的化合物都以莠去津為內(nèi)標(biāo)，20 min 之后以三苯基磷酸酯為 內(nèi)標(biāo)）。下表列出所有 122 種化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程以及線性相關(guān)系數(shù)，可以看出，應(yīng)用 TSQ 8000 Evo 快速掃描檢測這 122 種 化合物，可以得到良好的線性方式，有利于定量的準(zhǔn)確性。

4.3 重現(xiàn)性及低檢出限 用10ppb的樣品重復(fù)進(jìn)樣5針，檢測方法的重現(xiàn)性。所得的重現(xiàn)性結(jié)果如下圖所示，所有的化合物的重現(xiàn)性在1.01%-9.69%之間（如 表 2 所示）。 分別配置 100ppt、200ppt、500ppt、1ppb 以及 2ppb 的樣品，按照 S/N 為 3 和 S/N 為 10 來估算化合物的低檢出限及低定量限。

4.4 煙草中農(nóng)殘檢測的方法包 方法包是賽默飛世爾科技色譜質(zhì)譜部應(yīng)用部門針對客戶需求提 出的簡易儀器使用流程，方法包內(nèi)所涉及的化合物均為常見的 能在 GC/MS 上檢測的化合物，如農(nóng)藥殘留、多環(huán)芳烴、多氯 聯(lián)苯、多溴聯(lián)苯和多溴聯(lián)苯醚、鄰苯二甲酸酯等。方法包的作 用就是能使客戶更快更簡便得使用儀器，盡快上手。 方法包包括進(jìn)樣方法、數(shù)據(jù)處理方法（TraceFinder 方法文件 夾）、相關(guān)應(yīng)用文章、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、色譜柱信息、前處理方法， 數(shù)據(jù)文件等，客戶可以直接調(diào)用進(jìn)樣方法和數(shù)據(jù)處理方法完成 化合物的定性定量分析。

由于 TSQ 8000 Evo 采用 T-SRM 進(jìn)樣方法而不是分時間段的 掃描方法，原來的進(jìn)樣的方法可以直接調(diào)用，即使保留時間會 有微小的偏差，也不會影響終的結(jié)果。另外，TraceFinder 軟件自帶的數(shù)據(jù)庫可以直接編輯數(shù)據(jù)處理方法，數(shù)據(jù)庫里包 括化合物的名稱、離子對、碰撞能量、定量離子、定性離 子、CAS 號等信息。同時，TraceFinder 軟件可以根據(jù)數(shù)據(jù)處 理方法自動關(guān)聯(lián)生成 TSQ 8000 Evo 的方法文件。這樣應(yīng)用 TraceFinder 就可以直接生成數(shù)據(jù)處理方法和部分進(jìn)樣方法。 整個過程都是自動化的，幾乎不需要操作者手動輸入任何操作 信息。

想要快速建立方法時，直接拷貝方法包中的文件夾到 C:\ TraceFinderData\32\Methods 中，方法就可以在 TraceFinder 軟件中打開，這個方法包括數(shù)據(jù)處理方法和進(jìn)樣方法。

5. 結(jié)論： 應(yīng)用 Thermo ScientificTM 三重四極桿串接氣質(zhì)聯(lián)用儀 TSQ 8000 Evo，可以快速分析煙草中的農(nóng)藥殘留。方法學(xué)驗證表明，該 方法的線性、檢出限、RSD 值均滿足 YQ/T 47.1—2014 煙草及 煙草制品多種農(nóng)藥殘留量的測定以及 YQ 50—2014 煙葉農(nóng)藥 大殘留*的要求。應(yīng)用 Thermo Fisher 方法包，可以快速建 立進(jìn)樣方法和數(shù)據(jù)處理方法，拿來即用，無需從數(shù)據(jù)庫中整合 信息建立方法，而是直接用現(xiàn)成的方法，節(jié)省大量時間，提高 分析效率。一級和二級高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)，保證了定性和定量結(jié) 果的可靠性；媲美三重四極桿的靈敏度和寬線性范圍可輕 松定量藥物中的痕量雜質(zhì)。與三重四極桿質(zhì)譜相比，Q Exactive Focus 采用一級質(zhì)譜定量不需要優(yōu)化母離子，子離子參數(shù)，僅利 用目標(biāo)化合物精密分子質(zhì)量即可實現(xiàn)準(zhǔn)確定量，更為方便快速。 采用二級高分辨質(zhì)譜定量可以記錄子離子全掃描信息，通過在 數(shù)據(jù)后處理中靈活的挑選更具有專屬性的子離子進(jìn)行定量，有 效的排除基質(zhì)干擾，選擇性更好，靈敏度更高。