摘要：新的研究結(jié)果表明，某些血管緊張素 II 受體阻滯劑 (ARB) 藥物產(chǎn)品含有致癌性亞 硝胺雜質(zhì)[1]。因此，這類產(chǎn)品有許多被召回，表明行業(yè)迫切需要一種常規(guī)分析方法， 來檢出高于目標(biāo)濃度的致癌性亞硝胺雜質(zhì)。本應(yīng)用簡報(bào)介紹了基于靈敏的 Agilent Ultivo LC/TQ 的方法工作原理，它不僅適用于美國食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA) 列出的 六種亞硝胺，還適用于同時(shí)檢測六種其他可能致突變的亞硝胺雜質(zhì)。

召回纈沙坦、氯沙坦和厄貝沙坦等 ARB 藥物的宣布使 N-亞硝基雜質(zhì)成為 FDA 和 歐洲藥品管理局 (EMA) 等監(jiān)管機(jī)構(gòu)關(guān)注 的重點(diǎn)。亞硝胺雜質(zhì)是這些藥品生產(chǎn)過程 中產(chǎn)生的痕量副產(chǎn)品。這些雜質(zhì)被歸類 為疑似致癌物（即潛在遺傳毒性雜質(zhì)）。 本應(yīng)用簡報(bào)介紹了使用 Ultivo 三重四極桿 液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)進(jìn)行基于 LC/MS 的分析方 法。在極低檢測限下，對(duì) 12 種亞硝胺化 合物進(jìn)行了全面分析。所有亞硝胺雜質(zhì)的 分子量都很小，從 74 到 158 不等。雜質(zhì) 化合物包括： • N-亞硝基二jia胺 (NDMA) • N-亞硝基二乙胺 (NDEA) • N-亞硝基-4-甲基-4-氨基丁酸 (NMBA) • N-亞硝基異丙胺 (NEIPA) • N-亞硝基二異丙胺 (NDIPA) • N-亞硝基二丁胺 (NDBA) • N-亞硝基甲乙胺 (NMEA) • N-亞硝基吡咯烷 (NPyR) • N-亞硝基哌啶 (NPIP) • N-甲基-N-亞硝基苯 (NMPhA) • N-異丙甲基亞硝胺 (NMIPA) • N-叔丁基-N-乙基亞硝胺

實(shí)驗(yàn)部分：化學(xué)品與試劑 本研究使用的 12 種亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品均來 自 PS3 Labs LLP, Hyderabad, TS, India。 LC/MS 分析級(jí)溶劑（如甲醇、水）購 自 Honeywell。分析中用到的甲酸購自 Fluka。 數(shù)據(jù)分析 用 Agilent MassHunter 軟件 1.1 版對(duì) Ultivo 采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。利用 Agilent MassHunter Acquisition Optimizer 軟件 獲得 MS/MS 離子對(duì)并對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化， 在進(jìn)樣分析各種化合物的純?nèi)芤海舛?為 1000 ng/mL，在流動(dòng)注射模式下進(jìn)樣 量為 1 µL）時(shí)確定佳的母離子、子離 子、碎裂電壓和碰撞能量。

結(jié)果與討論：校準(zhǔn)濃度范圍為 0.05–100 ng/mL，詳細(xì) 信息匯總于表 4 中。所有分析物的 R2 值 均大于 0.996，在整個(gè)濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出 線性響應(yīng)。圖 1 顯示了 Ultivo TQ 的代表 性疊加 dMRM 色譜圖，展示了所有 12 種 亞硝胺化合物在 10 ng/mL 下的洗脫。

結(jié)論：Agilent Ultivo三重四極桿LC/MS液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)可以在監(jiān)管要求的低濃度水平下分析亞硝胺 雜質(zhì)。本應(yīng)用簡報(bào)表明 Ultivo LC/TQ 在檢 測某些低濃度亞硝胺雜質(zhì)方面的靈敏度。 該方法可用于不同 ARB 藥品中雜質(zhì)的定 量，并可根據(jù)藥品的洗脫模式改變色譜 條件。